DNA合成服务
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DNA合成简介

Oligo DNA的人工化学合成始于50年代初期,1980年,全自动的固相DNA合成仪面市后,使得快速、高效合成Oligo DNA成为可能,这极大地推动了生物工程技术的蓬勃发展。随着生物工程技术发展,人工合成Oligo DNA的需求量越来越大,已经成为分子生物学实验中最基础的试剂之一。而合成Oligo DNA的质量,将会直接影响科研人员实验计划的顺利进行。因此, 使用高质量的合成Oligo DNA制品变得尤为重要。

我公司合成Oligo DNA制品有如下特点。

1 高质量合成。使用进口试剂,合成高质量的DNA制品。

2 高纯度纯化。推出脱盐纯化、PAGE纯化、HPLC纯化三种级别制品,客户可根据实验需要进行选择。我们保证对每个制品都进行严格的质量管理。

3 完善的数据。制品包装中附有制品相关的多种数据,包括:合成的原始数据,A、G、C、T各碱基的分布情况,分子量,OD数,nmol数等,使用方便。

DNA合成的原理

现在一般都采用亚磷酰胺化学合成Oligo DNA片段,具有高效、快速偶联以及起始反应物比较稳定的特点。该方法是在固相载体上完成DNA链的合成的,合成时从3"→5"方向进行,通常3"端的第一个碱基结合在Glass担体(Controlled Pore Glass,CPG)上。Oligo DNA合成的原理基本相同,主要差别在于合成产率的高低、试剂消耗量和单个循环用时的不同。我公司采用的合成仪主要机型为ABI3900高通量合成仪。

合成的详细过程见图1,现简要说明如下:


图1 Oligo DNA合成原理图。N1代表第一个碱基,N2代表第二个碱基,依次类推。

第一步,三氯乙酸和预先连接在固相载体(CPG)上的第一个核苷酸反应(其活性基团处于被保护状态),脱去核苷酸5‘-羟基的保护基团DMT,获得游离的5‘-羟基;

第二步,活化新的碱基单体(Phosphoramidite),准备与第一个碱基进行反应;

第三步,合成DNA的原料(亚磷酰胺保护的核苷酸单体)与活化剂四氮唑混合,得到核苷亚磷酸活化中间体,它的3‘端被活化,5‘-羟基仍然被DMT保护,与溶液中游离的5‘-羟基发生缩合反应;

第四步,带帽(capping)反应,缩合反应中可能有极少数5‘-羟基没有参加反应(少于2%),用乙酸酐和1-甲基咪唑终止其后继续发生反应,这种短片段可以在纯化时分离掉;

第五步,在氧化剂碘的作用下,亚磷酰形式转变为更稳定的磷酸三酯。(即将三价磷氧化成五价磷) (重复进行Step1~Step5的循环,直至合成完所需的Oligo DNA序列)

第六步,合成结束后,将Oligo DNA分子从CPG上切下,再进行进一步的纯化。

合成过程中可以观察TCA处理阶段的颜色判定合成效率。连接在CPG上的引物被切下来,通过, PAGE等手段纯化引物,成品引物用C18浓缩、脱盐,测定OD260定量,根据定单要求分装。

DNA合成项目表

(一)常规合成(≤60bp)

片段长度
纯化方式
规格
单价(/碱基)
发货周期(工作日)
1540bp
OPC
2-5 OD
¥1.20
2
10 OD
¥1.80
2
30 OD
¥4.00
3
50 OD
¥8.00
3
15-60bp
PAGE
2 OD
¥1.60
3
5 OD
¥1.80
3
10 OD
¥2.20
3
二)长链合成(>60bp)
片段长度
纯化方式
规格
单价(/碱基)
发货周期(工作日)
6180bp
PAGE
2 OD
¥4.00
3
5 OD
¥6.50
3
10 OD
¥8.00
3
81-100bp
PAGE
1 OD
¥8.00
3
(三)硫代修饰(SPO3)
产量(OD)
发货时间(工作日)
纯化方式
单价(¥)
2
4
PAGE
8.00/base
5
4
PAGE
12.00/base
10
4
PAGE
15.00/base
30以上
待询
PAGE
询价
(四)特殊碱基
种类
产量(OD)
发货时间
纯化方式
单价(元/碱基)
d
2
4
PAGE
80
5
4
PAGE
120
d
2
4
PAGE
100
5
4
PAGE
140
5甲基化dC
2
4
PAGE
300
5溴dU
2
4
PAGE
300
(五)修饰/标记引物
分类
修饰/标记
纯化方式
2 OD
5 OD
10 OD
磷酸基团(Phosphorylation)
5" PO4
HPLC
¥200.00
¥300.00
¥400.00
3" PO4
HPLC
¥300.00
¥350.00
¥500.00
NH2修饰(Amino Linkers)
5" or 3" NH2 C3
HPLC
¥450.00
询价
询价
5" NH2 C6
HPLC
¥200.00
¥300.00
¥450.00
3" NH2 C7
HPLC
¥200.00
¥300.00
¥450.00
5" NH2 C12
HPLC
¥450.00
¥600.00
¥800.00
5" NH2 C6 dT
HPLC
¥500.00
¥700.00
¥1,000.00
3" NH2 C6 dT
HPLC
¥350.00
¥500.00
¥800.00
SH 修饰 (Thiolation)
3" SH C3
HPLC
¥350.00
¥480.00
¥600.00
5" SH C6
HPLC
¥400.00
¥500.00
¥800.00
Spacers
Spacer C3
HPLC
¥280.00
¥350.00
¥500.00
Spacer C6
HPLC
¥280.00
¥350.00
¥500.00
Spacer 9
HPLC
¥280.00
¥350.00
¥500.00
Spacer 18
HPLC
¥400.00
¥500.00
¥800.00
dSpacer
HPLC
¥500.00
¥700.00
¥1,000.00
生物素(Biotin)
5" Biotin
HPLC
¥300.00
¥350.00
¥500.00
3" Biotin
HPLC
¥350.00
¥400.00
¥600.00
5" Biotin TEG
HPLC
¥700.00
询价
询价
3" Biotin TEG
HPLC
¥600.00
询价
询价
5" Dual Biotin
HPLC
¥1,800.00
询价
询价
5" or Internal Biotin dT
HPLC
¥700.00
¥900.00
¥1,500.00
5" PC Biotin
HPLC
¥1,800.00
询价
询价
地高辛(Digoxin)
5" or 3" Digoxin
HPLC
¥600.00
¥800.00
¥1,200.00
荧光基团(Fluorophores)
5" Cy3
HPLC
¥1,200.00
¥1,500.00
¥2,500.00
3" Cy3
HPLC
¥1,300.00
¥1,600.00
¥2,600.00
Internal Cy3
HPLC
¥1,400.00
询价
询价
5" Cy5
HPLC
¥1,100.00
¥1,500.00
¥2,500.00
3" Cy5
HPLC
¥1,000.00
¥1,800.00
¥2,600.00
Internal Cy5
HPLC
¥1,400.00
询价
询价
5" FAM
HPLC
¥280.00
¥320.00
¥450.00
3" FAM
HPLC
¥300.00
¥350.00
¥500.00
5" HEX
HPLC
¥450.00
¥600.00
¥900.00
5" TET
HPLC
¥450.00
¥600.00
¥900.00
5" 6-JOE
HPLC
¥550.00
¥650.00
¥900.00
3" 6-JOE
HPLC
¥550.00
¥700.00
¥1,000.00
5" Rox
HPLC
¥500.00
¥600.00
¥900.00
3" Rox
HPLC
¥550.00
¥700.00
¥1000.00
5" TAMRA
HPLC
¥450.00
¥600.00
¥850.00
3" TAMRA
HPLC
¥500.00
¥650.00
¥950.00
5" FITC
HPLC
¥300.00
 
 
3" FITC
HPLC
¥350.00
 
 
Internal TAMRA
HPLC
¥1000.00
询价
询价
淬灭基团(Quenchers)
3" DABCYL
HPLC
¥750.00
¥900.00
¥1,200.00
3" BHQ 1
HPLC
¥600.00
¥800.00
¥1,100.00
3" BHQ 2
HPLC
¥600.00
¥800.00
¥1,100.00
电化学标记(Electrochemicals)
Ferrocene
HPLC
¥550.00
¥700.00
¥1,000.00
其它
电询
(六)双标记荧光探针
分类
标记
纯化方式
2 OD
5 OD
10 OD
3" TAMRA
5" FAM-3" TAMRA
2HPLC纯化
¥1,000.00
¥1,200.00
¥1,800.00
5" HEX-3" TAMRA
2HPLC纯化
¥1,400.00
¥1,600.00
¥2,000.00
5" TET-3" TAMRA
2HPLC纯化
¥1,400.00
¥1,600.00
¥2,000.00
5" JOE-3" TAMRA
2HPLC纯化
¥1,400.00
询价
询价
3" DABCYL
5" FAM-3" DABCYL
HPLC
¥1,000.00
¥1,200.00
¥1,800.00
5" HEX-3" DABCYL
HPLC
¥1,200.00
¥1,400.00
¥2,000.00
5" TET-3" DABCYL
HPLC
¥1,200.00
¥1,400.00
¥2,000.00
5" JOE-3" DABCYL
HPLC
¥1,300.00
询价
询价
5" TAMRA-3" DABCYL
HPLC
¥1,400.00
询价
询价
5" Cy5-3" DABCYL
HPLC
¥1,300.00
¥1,600.00
¥2,000.00
3" BHQ1
5" FAM-3" BHQ1
HPLC
¥1,000.00
¥1,200.00
¥1,450.00
5" HEX-3" BHQ1
HPLC
¥1,200.00
¥1,400.00
¥1,800.00
5" JOE-3" BHQ1
HPLC
¥1,100.00
询价
询价
BHQ2
5" ROX-3" BHQ2
HPLC
¥1,000.00
¥1,300.00
¥1,800.00
ECLIPSE
5" FAM-3" ECLIPSE
HPLC
¥1,000.00
¥1,200.00
¥1,800.00
5" HEX-3" ECLIPSE
HPLC
¥1,000.00
询价
询价
5" TET-3" ECLIPSE
HPLC
¥1,200.00
询价
询价
5" JOE-3" ECLIPSE
HPLC
¥1,100.00
询价
询价
5" TAMRA-3" ECLIPSE
HPLC
¥900.00
¥1,200.00
¥1,800.00
5" Rox-3" ECLIPSE
HPLC
¥900.00
¥1,200.00
¥1,800.00
其它
电询

(七)、简并碱基及代码

简并代码 M R W S Y K V H D B N
代表碱基 A/C A/G A/T C/G C/T G/T A/C/G A/C/T A/G/T C/G/T A/C/G/T